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NRPB56L GST-琼脂糖凝胶4B

发布日期:2021-10-27 阅读次数:2564

品  名:GST-琼脂糖凝胶4B

英文名:Glutathione NUPharose 4B

目录号:NRPB56L .NRPB56S(预装柱)

规  格:20 ml100 ml1L1 ml预装柱5 ml预装柱特殊规格订制

运  输:2 ~ 30℃常压 .避光

贮  存:20%乙醇2~8℃

保质期:3.


相关介绍:

GST-琼脂糖凝胶4B是1种将谷胱甘肽键合于琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质主要用于谷胱甘肽转移酶标记蛋白(GST融合蛋白) .谷胱甘肽转移酶和谷胱甘肽依赖蛋白的分离纯化通过1步亲和层析就能获得高纯度的蛋白.与GST-琼脂糖凝胶FF相比GST-琼脂糖凝胶4B能获得更高的载量.


技术指标:

基质

4%高度交联琼脂糖凝胶

谷胱甘肽

密度

20μmol/ml

填料粒径

60~180 μm

蛋白质载量

25mg谷胱甘肽-S-转移酶(28kDa)/ml

好的流速

100 cm/h

推荐流速

10~50 cm/h

0.1 MPa

pH稳定性

3-12(长时间);3-13(短时间)

化学稳定性

于以下溶液中稳定:常用的水相缓冲液;0.1mol/L NaOH6mol/L盐酸胍;70%乙醇.


使用方法:

1. 装柱

1.1 根据分离目标性质配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液.

1.2 将凝胶抽干并用蒸馏水洗涤2次去除保存的乙醇用蒸馏水配成匀浆并脱气.

1.3 将层析柱垂直固定底端用水或缓冲液润湿并保持1段液位.

1.4 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁1次性倒入柱内使凝胶于柱内自由沉降.

1.5 连结好柱子顶端活动柱头打开蠕动泵让缓冲液用使用时操作流速流过5柱体积再使用1.5倍的操作流速流过5柱体积调节适配柱头使其尽量贴近胶面最后用2-3倍柱体积的缓冲液平衡柱子.

注意:(1)所有操作过程不能引入气泡保证装胶的均匀度.(3)如无条件做1.2填料层有气泡可进行2次装柱去除保存的乙醇和气泡.(4)乙醇等试剂配制的溶液需要脱气.

2. 平衡

将平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱观察检测器的变化直到电导 .pH等参数不变.推荐的结合平衡缓冲液为:10mM PBS (140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH 7.4).

3. 上样

切换转换阀进行上样上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择也可进行线性实验找到最佳上样量;样品的预处理:置换缓冲液澄清过滤(0.45 .0.22μm)等.

4. 冲洗

用2-3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱观察检测器的变化直到电导 .pH等参数不变此时未交换的组分被清洗出去.

5. 洗脱

1般推荐用10mM还原型谷胱甘肽溶液(可含缓冲成分)进行洗脱.推荐的洗脱缓冲液为:50mM Tris-HCl, 10 mM 还原型谷胱甘肽(GSH), pH 8.0.

6. 再生

用蒸馏水按操作流速冲洗3-5个柱体积接着用平衡液洗到平衡3-5个柱体积.

若有失活蛋白质或脂类物质于再生时洗不掉可用于位清洗(CIP)除去.

7. 于位清洗(CIP)

去除沉淀和变性蛋白:用2CV 6M盐酸胍清洗立即用10mM PBS(pH7.4)洗5CV.

去除强疏水蛋白:用3-4CV 70%乙醇清洗立即用10mM PBS(pH7.4)洗5CV.

推荐流速

预装柱体积(ml

1

5

10

流速(ml/min

0.2

1

2

导购指南


中文名

英文简称

货号

规格

产品描述

重力预装柱

GST-琼脂糖凝胶4B重力预装柱

GST NUPharose 4B pre-packed column

NRPB56S-Z11

1*1mL

1支*1ml

NRPB56S-Z41

4*1mL

4支*1ml

NRPB56S-Z15

1*5mL

1*5mL

NRPB56S-Z25

2*5mL

2支*5mL

AKTA中压预装柱

GST-琼脂糖凝胶4B中压预装柱

GST NUPharose 4B pre-packed column

NRPB56S-Y11

1*1mL

1支*1ml

NRPB56S-Y41

4*1mL

4支*1ml

NRPB56S-Y15

1*5mL

1*5mL

NRPB56S-Y25

2*5mL

2支*5mL

填料

GST-琼脂糖凝胶4B

GST NUPharose 4B

NRPB56L-10

10mL

1瓶*10ml

NRPB56L-20

20mL

1瓶*20ml

NRPB56L-100

100mL

1瓶*100ml

NRPB56L-500

500ml

1瓶*500ml

注:yabo官网生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积


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