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NRPB01L 重组蛋白A琼脂糖凝胶FF

发布日期:2021-10-27 阅读次数:3259

品  名: 重组蛋白A 琼脂糖凝胶FF

英文名: Recombinant Protein A NUPharose Fast Flow, rProtein A NUPharose FF

目录号: NRPB01L .NRPB01S(预装柱)

规  格: 20 ml100 ml1 L1 ml预装柱5 ml预装柱特殊规格订制

运  输: 2 ~ 25℃常压 .避光

贮  存: 20%乙醇2 ~ 8℃

保质期: 3 .


相关介绍: 

蛋白A是1种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质包含有5个区域可以同IgG的Fc片段结合.作为1个亲和配基蛋白A能够比较紧密地偶联到NUPharose上使得这些区域可以同游离的IgG自由结合.1分子的蛋白A可以结合两分子的IgG.


技术指标:

基质

4%高度交联琼脂糖凝胶

配基

重组蛋白A

配基密度

 6 mg/ml

填料粒径

60 ~ 180 μm

好的流速

800 cm/h

推荐流速

20 ~ 100 cm/h

pH稳定性

pH 3 ~ 9

耐反压

0.3 MPa

载量

≥40 mg/ml IgG


抗体与蛋白A .蛋白G的结合力:

种类

Species

亚型

Antibody Class

蛋白A

Protein A

蛋白G

Protein G

Human

IgG1

IgG2

IgG3

IgG4

IgM

IgD

IgA

Fab

+++

+++

+

+++

+

-

+

+

+++

+++

+++

+++

-

-

-

+

小鼠

Mouse

IgG1

IgG2a

IgG2b

IgG3

IgM

+

+++

+++

+++

-

++

+++

+++

+++

-

大鼠

Rat

IgG1

IgG2a

IgG2b

IgG2c

+

-

-

+++

++

+++

+

+++

Cow

IgG1

IgG2

+

+++

+++

+++

山羊

Goat

IgG1

IgG2

+

+++

+++

+++

Horse

IgG(ab)

IgG(c)

IgG(T)

+

+

-

-

-

+++

Rabbit

IgG

+++

+++

Pig

IgG

+++

+

Dog

IgG

+++

+

Chicken

IgY

-

-

注:-表示不结合;+表示微弱结合;++表示中等结合;+++表示很强结合.


应用举例:

结合缓冲液:20 mM磷酸缓冲液150 mM NaClpH 7.4

洗脱缓冲液:0.1 M柠檬酸缓冲液pH 4.0

中和缓冲液:1 M Tris ~ HClpH 9.0

1)1 ml重组蛋白A琼脂糖凝胶预填柱用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液;

2)用结合缓冲液结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积;

3)将5 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释到50 ml0.45 μm4す松涎

4)用结合缓冲液再洗 5 ~ 10个柱床体积;

5)用洗脱缓冲液洗脱抗体收集洗脱峰并用中和缓冲液调节其pH至中性;

6)每次使用后用3 ~ 5个柱床体积的0.1 M 柠檬酸缓冲液(pH 3.0)再生清洗;

7)SDS-PAGE(图1)电泳分析洗脱下来的兔多抗纯度于95%以上.


图片44.jpg

图 1


注意事项:

1)预填柱使用简易方便于没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务.

2)样品洗脱后1般pH很低应立即用碱性中和缓冲液(如1 M Tris-HClpH 9.0)将收集到的抗体溶液中和到中性或于收集容器中事先装5% ~ 20% .pH 7 ~ 9的缓冲液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液)以利于维持抗体的生物活性避免抗体失活.

3)使用时保证柱子和缓冲液的温度1致避免柱床内产生气泡影响纯化效果如果已经产生气泡可以自行重装柱子.

4)通常(每次)目标样品洗脱后应继续用0.1 M柠檬酸缓冲液(pH 2 ~ 3)洗3 ~ 5个柱体积然后用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上作简易再生.

5)使用数次后应进行于位清洗建议用0.1% Triton X-100 37℃洗1 ~ 3个柱体积(10 ~ 30 min)立即用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上;或70%乙醇洗5个柱体积以上(可保持4 ~ 16 h)再用平衡缓冲液清洗5柱体积以上.于位清洗能去除强疏水性蛋白质和脂类恢复柱子的载量和流速.

6)

推荐流速

预装柱体积ml

1 ml

5 ml

10 ml

流速(ml/min)

0.2

1

2

导购指南

中文名

英文简称

货号

规格

产品描述

重力预装柱

重组蛋白A琼脂糖凝胶FF重力预装柱

ProA NUPharose FF pre-packed column

NRPB01S-Z11

1*1mL

1*1ml

NRPB01S-Z41

4*1mL

4*1ml

NRPB01S-Z15

1*5mL

1*5mL

NRPB01S-Z25

2*5mL

2*5mL

AKTA中压预装柱

重组蛋白A琼脂糖凝胶FF中压预装柱

ProA NUPharose FF pre-packed column

NRPB01S-Y11

1*1mL

1*1ml

NRPB01S-Y41

4*1mL

4*1ml

NRPB01S-Y15

1*5mL

1*5mL

NRPB01S-Y25

2*5mL

2*5mL

填料

重组蛋白A琼脂糖凝胶FF

ProA NUPharose FF

NRPB01L-10

10mL

1*10ml

NRPB01L-20

20mL

1*20ml

NRPB01L-100

100mL

1*100ml

NRPB01L-500

500ml

1*500ml

注:yabo官网生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积


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