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NRPB08L GST-琼脂糖凝胶FF

发布日期:2021-10-27 阅读次数:2901

品  名:GST-琼脂糖凝胶FF

英文名:Glutathione NUPharose Fast Flow, GST NUPharose FF

目录号:NRPB08L .NRPB08S(预装柱)

规  格:20 ml100 ml1 L1 ml预装柱5 ml预装柱特殊规格订制

运  输:2 ~ 30℃常压 .避光

贮  存:20%乙醇2 ~ 8℃

保质期:3.


相关介绍:

GST-琼脂糖凝胶FF是1种将谷胱甘肽键合于琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质.该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构与生物活性大分子有很好的相容性具有载量高非特异性吸附少流速快等特点主要用于谷胱甘肽转移酶标记蛋白(GST融合蛋白) .谷胱甘肽转移酶和谷胱甘肽依赖蛋白的分离纯化.


技术指标:

基质

4%高度交联琼脂糖凝胶

配基

谷胱甘肽

配基密度

≥10 μmol/ml

填料粒径

60 ~ 180 μm

蛋白质载量

10mg谷胱甘肽-S-转移酶/mL

好的流速

300 cm/h

推荐流速

20 ~ 100 cm/h

耐反压

0.3 MPa

pH稳定性

3 ~ 12(长时间);3 ~ 13(短时间)

化学稳定性

于以下溶液中稳定:常用的水相缓冲液;1 M乙酸(pH 4.0);6 M盐酸胍;70% 乙醇.


使用方法:

  1. 装柱

  1.1 根据分离目标性质配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液.

  1.2 将凝胶抽干并用蒸馏水洗涤2次去除保存的乙醇用蒸馏水配成匀浆并脱气.

  1.3 将层析柱垂直固定底端用水或缓冲液润湿并保持1段液位.

  1.4 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁1次性倒入柱内使凝胶于柱内自由沉降.

  1.5 连结好柱子顶端活动柱头打开蠕动泵让缓冲液用使用时操作流速流过5柱体积再使用1.5倍的操作流速流过5柱体积调节适配柱头使其尽量贴近胶面最后用2 ~ 3倍柱体积的缓冲液平衡柱子.


注意:

1)所有操作过程不能引入气泡保证装胶的均匀度.

2)如无条件做1.2填料层有气泡可进行2次装柱去除保存的乙醇和气泡.

3)乙醇等试剂配制的溶液需要脱气.

  2. 平衡

  将平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱观察检测器的变化直到电导 .pH等参数不变.推荐的结合平衡缓冲液为:10 mM PBS (140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.4).

  3. 上样

  切换转换阀进行上样上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择也可进行线性实验找到最佳上样量;样品的预处理:置换缓冲液澄清过滤(0.45 .0.22 μm)等.

  4. 冲洗

  用2 ~ 3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱观察检测器的变化直到电导 .pH等参数不变此时未交换的组分被清洗出去.

  5. 洗脱

  1般推荐用10 mM还原型谷胱甘肽溶液(可含缓冲成分)进行洗脱.推荐的洗脱缓冲液为:50 mM Tris-HCl, 10 mM 还原型谷胱甘肽(GSH), pH 8.0.

  6. 再生

  用蒸馏水按操作流速冲洗3 ~ 5个柱体积接着用平衡液洗到平衡3 ~ 5个柱体积.

  若有失活蛋白质或脂类物质于再生时洗不掉可用于位清洗(CIP)除去.

  7. 于位清洗(CIP)

去除沉淀和变性蛋白:用2 CV 6 M盐酸胍清洗立即用10 mM PBS(pH 7.4)洗5 CV.

去除强疏水蛋白:用3 ~ 4 CV 70%乙醇清洗立即用10 mM PBS(pH 7.4)洗5 CV.


注意事项:

推荐流速

预装柱体积ml

1 ml

5 ml

10 ml

流速(ml /min )

0.2

1

2

导购指南


中文名

英文简称

货号

规格

产品描述

重力预装柱

GST-琼脂糖凝胶FF重力预装柱

GST NUPharose FF pre-packed column

NRPB08S-Z11

1*1mL

1*1ml

NRPB08S-Z41

4*1mL

4*1ml

NRPB08S-Z15

1*5mL

1*5mL

NRPB08S-Z25

2*5mL

2*5mL

AKTA中压预装柱

GST-琼脂糖凝胶FF中压预装柱

GST NUPharose FF pre-packed column

NRPB08S-Y11

1*1mL

1*1ml

NRPB08S-Y41

4*1mL

4*1ml

NRPB08S-Y15

1*5mL

1*5mL

NRPB08S-Y25

2*5mL

2*5mL

填料

GST-琼脂糖凝胶FF

GST NUPharose FF

NRPB08L-10

10mL

1*10ml

NRPB08L-20

20mL

1*20ml

NRPB08L-100

100mL

1*100ml

NRPB08L-500

500ml

1*500ml

注:yabo官网生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积


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